檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被高密度脂蛋白(HDL)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的高密度脂蛋白(HDL)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被高密度脂蛋白(HDL)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的高密度脂蛋白(HDL)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于1.0 mg/dL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
上海舒話生物是一家集科研、生產、銷售為一體的生物,以科研試劑生產、診斷試劑原料供應產品生產為核心,致力于為全球來自高等院校、政府研究機構、診斷試劑生產廠家以及生物公司的廣大客戶們提供高質量生物產品,產品擁有質量保證,有問題免費包換,還可以免費代測,想進一步了解我們的產品歡迎您前來詳詢。